99精品欧美一区二区三区黑,久久久久久久久久久午夜福利,91狠狠人妻久久久久久综合,亚洲欧美日韩一区二区搜索

您好!歡迎訪問(wèn)和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

18616108315

當(dāng)前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 標(biāo)記二抗的選擇及應(yīng)用實(shí)例

標(biāo)記二抗的選擇及應(yīng)用實(shí)例

更新時(shí)間:2023-05-11      點(diǎn)擊次數(shù):1121
  標(biāo)記二抗的作用:
 
  二抗是在其它宿主體內(nèi)制備的能與一抗或一抗片段結(jié)合的抗體,上面通常連有酶或熒光素等標(biāo)簽。由于標(biāo)記二抗所具備的優(yōu)點(diǎn)使得其在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中得以應(yīng)用廣泛,如western blot(通過(guò)與特異性抗體結(jié)合來(lái)鑒定蛋白質(zhì)),ELISA,免疫組織化學(xué)(檢測(cè)組織中的特異性抗原),免疫細(xì)胞化學(xué)(通過(guò)免疫學(xué)方法檢測(cè)細(xì)胞的抗原組成),流式細(xì)胞術(shù)及免疫沉淀(通過(guò)抗原與抗體的特異性結(jié)合作用來(lái)分離相應(yīng)抗原)。
 
  二抗針對(duì)某一特定物種(如小鼠)的所有抗體均具有特異性,因而使用標(biāo)記二抗可以免去對(duì)每一個(gè)一抗進(jìn)行標(biāo)記,大大節(jié)省了時(shí)間和費(fèi)用;此外,一個(gè)一抗分子可以同時(shí)結(jié)合幾個(gè)二抗分子,從而使信號(hào)大大增強(qiáng),提高了實(shí)驗(yàn)靈敏度。
 
  標(biāo)記二抗可以耦聯(lián)有幾種不同的標(biāo)記,可以是酶,熒光素,或生物素。
 
  標(biāo)記二抗的選擇:
 
  通常情況下,某一特定的實(shí)驗(yàn)中可能同時(shí)有幾種二抗可供選擇,如何能選擇到該實(shí)驗(yàn)的二抗,需要綜合以下幾個(gè)方面進(jìn)行考慮:
 
  一抗的物種來(lái)源
 
  一抗是在什么物種來(lái)源的,相應(yīng)的二抗也要是抗該物種的抗體。例如,如果一抗是在小鼠體內(nèi)制備的,那么你就應(yīng)當(dāng)選擇抗小鼠的二抗,如果一抗是在兔體內(nèi)制備的,那么二抗就應(yīng)當(dāng)是抗兔的抗體。至于二抗本身是在什么動(dòng)物中制備的對(duì)二抗的質(zhì)量并無(wú)明顯的影響。
 
  一抗是屬于哪個(gè)類或亞類
 
  二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。這通常是針對(duì)單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應(yīng)的標(biāo)記二抗就是抗IgG抗體。單克隆抗體的類別及亞類通常會(huì)在產(chǎn)品列表中列出,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgM,或是抗小鼠IgG抗體。
 
  如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合,或者你也可以選擇專門針對(duì)這一亞類的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那么二抗在雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中尤其適合。
 
  如果你不知道一抗是哪一類別或亞類,那么抗小鼠IgG是一個(gè)不錯(cuò)的選擇,因?yàn)榇朔N抗體可以識(shí)別大多數(shù)類型的IgG免疫球蛋白。
 
  標(biāo)記二抗應(yīng)用實(shí)例分析
 
  為分析標(biāo)記二抗的使用情況,我們隨機(jī)抽取了100篇2007年或2008年發(fā)表于Science 或 Journal of Biological Chemistry雜志上的 文章(英文),這些文章涵蓋了來(lái)自于16個(gè)國(guó)家的約80個(gè)研究機(jī)構(gòu)。收集的數(shù)據(jù)顯示二抗的使用非常廣泛,可以應(yīng)用到幾乎所有類型的免疫檢測(cè)中,尤其是Western blot、免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)。事實(shí)上,二抗在ELISA及流式細(xì)胞術(shù)中應(yīng)用也很廣泛,不僅用于科學(xué)研究,而且廣泛的應(yīng)用于臨床分析和疾病診斷。比較而言,二抗在免疫沉淀中的應(yīng)用相對(duì)較少。以下內(nèi)容是基于對(duì)所收集的二抗信息進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后得出的一些結(jié)論,對(duì)于您在具體的實(shí)驗(yàn)中如何選擇的抗體具有借鑒作用。
 
  選擇二抗時(shí),您必須考慮到以下因素,如一抗的物種、產(chǎn)生二抗的宿主、一抗的類別或亞類、二抗所耦聯(lián)的探針類型及二抗的形式(如整個(gè)IgG分子,F(xiàn) (ab’) 2片段,或Fab片段)等等。因此選擇哪種類型的二抗很大程度上決定于您所使用的一抗是什么,尤其針對(duì)種屬和類別而言。通常情況下,一抗可以在山羊、小鼠、兔子、大鼠及綿羊體內(nèi)制備,其中屬小鼠及兔子zui為常見(jiàn),相應(yīng)的,標(biāo)記二抗的種屬也應(yīng)當(dāng)與一抗的相一致。而對(duì)于制備二抗的宿主,則應(yīng)選擇另外一種不同的動(dòng)物,一般選用驢、山羊、兔子、綿羊或其他較大的動(dòng)物,可以實(shí)現(xiàn)二抗的大規(guī)模制備,其中又屬山羊使用zui多。
 
  對(duì)于二抗類別或亞類的選擇,應(yīng)遵循與一抗類別或亞類相一致的原則,其中抗IgG使用zui多。這可能是因?yàn)槌宋宸N類別的單克隆抗體外,很多一抗是多克隆抗體,屬于IgG類免疫球蛋白。此外anti-IgG可以識(shí)別幾乎所有類型的IgG亞類,因此,在不清楚一抗是屬于那個(gè)類別或亞類的時(shí)候,anti-IgG抗體是個(gè)不錯(cuò)的選擇。從我們的數(shù)據(jù)來(lái)看,值得注意的是, IgG亞類特異性的二抗(如抗IgG1,抗IgG2,抗IgG2a,抗IgG2b)通常用于雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,包括免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)及流式細(xì)胞術(shù)。
 
  此外,整個(gè)IgG分子是zui常用的一種二抗分子形式,而F (ab’) 2片段或Fab片段一般僅用于特殊實(shí)驗(yàn)中,如需要避免抗體與具有Fc受體的細(xì)胞結(jié)合的情況,或需要封閉內(nèi)源性免疫球蛋白的時(shí)候。
微信咨詢
地址:上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2025 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號(hào):滬ICP備2023007219號(hào)-1
国产欧美日本不卡精美视频-日本后入视频在线观看| 国产精品电影在线一区-亚洲国产大片一区二区官网| 亚洲精品在线观看一二三区-在线观看国产中文字幕视频| 一区二区三区女同性恋-熟妇高潮一区二区高清网络视频| 人妻日韩精品中文字幕图片-麻豆极度性感诱人在线露脸| 久艹在线观看视频免费-人妻偷人精品一区二区三区| 天天干天天天天天天天-亚洲综合av在线三区| 蜜臀av日日欢夜夜爽一区-av在线免费永久播放| 99精品只有久久精品免费-蜜臀一区二区三区精品久久久| 黄片黄片在线免费观看-激情综合网激情五月俺也去| 午夜日韩精品在线视频-亚洲网老鸭窝男人的天堂| 国产高清av免费在线观看-黄片毛片大全一区二区三区| 一区二区国产高清在线-日本高清无卡一区二区三区| 色噜噜噜噜一区二区三区-欧美最猛黑人做爰视频| 九九热这里只有精品九九-欧美日韩人妻精品一二三| 亚洲另类自拍唯美另类-99国产精品兔免久久| 国产精品成人欧美激情-黄色床上完整版高清无遮挡| av噜噜国产在线观看-欧美视频亚洲视频一区二区三区| 三级a级一级大片在线观看-日韩av有码免费观看| 日韩中文字幕v亚洲中文字幕-日韩亚洲av免费在线观看| 久久精品国产96精品-日韩人成理论午夜福利| 国产精品熟女视频一区二区-国产日韩精品欧美一区喷水| 精品一区二区三区av在线-欧美黑人巨大精品一区二区| 国产黄片在现免费观看-色老板最新在线播放一区二区三区| 久久人妻一区二区三区欧美-国内不卡的一区二区三区| 人妻丝袜中文字幕在线视频-亚洲成av人片一区二区三区| 久色高清精品在线国产-国产精品视频一区三区四区| 一级特黄大片亚洲高清-国产精品视频伊人久久| 精品少妇一区二区18-一区二区三区日韩在线播放| 欧美日韩国产在线资源-超碰成人国产一区二区三区| 日韩二级视频在线观看-美女扒开奶罩露出奶子的视频网站| 性色国产成人久久久精品二区三区-偷窥中国美女洗澡视频| 中文不卡一区二区三区-老司机在线老司机在线一区| 国产一区二区三区四区五区麻豆-欧美一级在线视频播放| 日本高清二区视频久二区-大香蕉在线视频大香蕉在线视频| 久久久噜噜噜久久狠狠50岁-精品一区二区三区av| 五月婷婷免费观看视频-男人操女人下面视频在线免费看| 亚洲一区精品一区在线观看-日本久久久一区二区三区| 国产一区二区三区噜噜-精品久久亚洲一区二区欧美| 国产一级片久久免费看同-麻豆精品尤物一区二区青青| 中文字幕日本在线资源-国产+成+人+亚洲欧洲自线|